DNA退火缓冲液使用说明

Annealing Buffer for DNA Oligos(5X)

货号        规格

D0211                         5ml

简介：本Annealing Buffer可以用于DNA oligo退火，不可用于RNA oligo 的退火。退火后产物可以直接和经酶切、纯化的质粒连接。通常转化后可以得到大量的阳性克隆。

保存条件：

-20℃保存，一年有效。

操作步骤

1. 把要退火的DNA oligo用经灭菌的三蒸水配制成50μM。解冻Annealing Buffer for DNA Oligos(5X)，混匀备用。如经常使用，本Buffer可放置2-8℃一个月。

2. 如下设置退火反应体系：

   按照上述顺序依次加入各种试剂，混匀。放入PCR仪。

3. 如下设置PCR仪进行退火反应：

   注1：如果所用的PCR仪不具备下降0.1℃的功能，也可以设置为每90秒下降1℃。

4. 退火结束后可以直接用于连接反应，也可以在-20℃冻存备用。如果退火结束后打算进行酶切等其它反应，最好用纯化试剂盒进行纯化，或者确保退火产物在反应体系中体积不超过10%，以避免AnnealingBuffer对后续的酶反应体系的干扰。