说明:气相色谱固定液分离分析烃类化合物、含氧化合物(醇、酯、酮)、碱性和中性含氮化合物、硫醇。非离子表面活性。 别名:辛基苯基聚氧乙烯醚;OP乳化剂; 4-(1,1,3,3-Tetramethylbutyl)cyclohexyl-polyethylene glycol 分子式:C14H22O(C2H4O)7-8 分子量:536.0 CAS#:9036-19-5 外观:浅色粘稠状液体 特性:R:36/37/38 S:36/37/39 储存条件:易吸潮,室温保存
Triton X-114可用于膜蛋白的提取。提取方法如下: 1、配制疏水性蛋白提取液(非裂解液):1% Triton X-114,150mM NaCl, 10mM Tris-HCl,1mM EDTA,调pH值至8.0备用。 2、菌液于4℃条件下15000g离心15min收集菌体;用1ml 含有5mM MgCl2 的PBS洗涤3次,最后于4℃条件下15000g离心15min收集菌体。 3、菌体沉淀加入1ml冷提取液,于4℃条件下放置2h,17000g离心10min,去除沉淀取上清。 4、将上述上清中的Triton X-114含量增加到2%,再加入20mM的CaCl2抑制部分蛋白酶活性,37℃条件下放置10min使其分层。室温下1000g离心10min使液相和去污相充分分层。 5、将液相和去污相分开,分别用10倍体积的冷丙酮在冰上沉淀45min。 6、于4℃条件下17000g离心30min,用去离子水洗涤沉淀3次。 7、将沉淀溶解在1% SDS溶液中,测定蛋白浓度,比较液相和去污相中蛋白提取效率,一般是去污相中疏水性膜蛋白较多,适于进一步蛋白实验。 8、SDS-PAGE进一步分析液相和去污相的蛋白图谱。 |